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[发明专利]一种肿瘤标志物循环肿瘤DNA检测芯片及试剂盒-CN201811441143.0在审
发明人：仰大勇;张杰;李敏;董宇航 -专利权人：天津大学
申请日： 2018-11-29 - 公布日： 2019-02-15 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明公开一种肿瘤标志物循环肿瘤DNA检测芯片及试剂盒，一种肿瘤标志物循环肿瘤DNA检测芯片，包括负载有纳米金属的基板，所述纳米金属与拉曼信号分子连接，拉曼信号分子通过连接分子与茎环结构探针连接。本发明利用纳应力传感，循环肿瘤DNA的浓度信息转化为信号分子的特征峰位移量，从而可以通过其来检测循环肿瘤DNA绝对浓度，检测准确性更高；肿瘤标志物循环肿瘤DNA检测探针是茎环结构形式的探针，有利于增加循环肿瘤DNA检测的特异性；肿瘤标志物循环肿瘤DNA检测探针是DNA‑RNA嵌合体结构，基于此引入Rnase HII不仅可以提高循环肿瘤DNA检测特异性，并且可以引发循环反应，增加其检测灵敏度。
循环肿瘤肿瘤标志物拉曼信号分子茎环结构纳米金属试剂盒芯片检测灵敏度连接分子浓度信息探针连接信号分子循环反应嵌合体特征峰位移量检测传感基板探针引入转化

[发明专利]一种提高循环肿瘤DNA检出率的检测装置及方法-CN201810435722.8有效
发明人：林云富 -专利权人：浙江品级基因科技有限公司
申请日： 2018-05-08 - 公布日： 2022-09-06 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高循环肿瘤DNA检出率的检测装置及方法。所述检测装置包括：模板制备单元，用于制备抛锚搭桥模板；分子延伸单元，用于利用抛锚搭桥模板将循环肿瘤DNA分子片段进行延伸，所述抛锚搭桥模板的长度长于所述循环肿瘤DNA分子片段；模板清除单元，用于清除所述抛锚搭桥模板，获得延伸后的循环肿瘤DNA分子片段，所述延伸后的循环肿瘤DNA分子片段能够被PCR方法扩增。本发明检测装置及方法使得循环肿瘤DNA分子的检测灵敏度提高了三倍左右，这对于目前的循环肿瘤DNA分子检测技术是一个很重要的进步。
一种提高循环肿瘤 dna 检出检测装置方法

[发明专利]循环肿瘤DNA参考品的制备方法、产品及用途-CN202111029341.8在审
发明人：钟果林;茅矛;李世勇;朱丹丹;陈彦;封裕敏;吴巍 -专利权人：深圳思勤医疗科技有限公司;郑州思勤生物科技有限公司
申请日： 2021-09-01 - 公布日： 2021-12-21 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本申请提出了一种制备循环肿瘤DNA参考品的方法，该方法包括：将获得的肿瘤细胞进行诱导细胞凋亡，以便获得具有断裂DNA的肿瘤细胞；对所述具有断裂DNA的肿瘤细胞进行DNA提取，以便获得所述循环肿瘤DNA参考品本申请所提出的参考品制备方法简单易行，适合于各种肿瘤细胞的循环肿瘤DNA参考品制备，并且其所保留的变异信息能够模拟动物体内循环肿瘤DNA的情况，利于检测方法的校正、评估。
循环肿瘤 dna 参考制备方法产品用途

[发明专利]PNA检测母体血液中的循环胎儿DNA的应用及方法-CN201310662370.7无效
发明人：叶盛 -专利权人：苏州九域星医疗科技有限公司
申请日： 2013-12-10 - 公布日： 2014-03-19 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了PNA在检测母体血液中的循环胎儿DNA上的应用及一种用PNA检测母体血液中的循环胎儿DNA的方法，其步骤包括：（1）针对待测基因设计合成引物序列及相对应的PNA序列；（2）提取母体样品中的DNA；（3）酶切；（4）扩增，以酶切后的DNA作为模板，加入引物及PNA进行扩增，检测扩增结果。本发明选择了仅对非甲基化DNA起作用的限制性内切酶，并设计引物序列及PNA序列，本发明方法可以选择性的扩增母体血液中的循环胎儿DNA而将母体DNA的影响排除，达到快速、灵敏的检测母体血液中的循环胎儿DNA
pna 检测母体血液中的循环胎儿 dna 应用方法

[发明专利]一种基于自环放大原理的循环DNA预扩增方法-CN201611030621.X在审
发明人：龚建;冯晓燕;林挺;王文利;于祥春 -专利权人：北京爱普拜生物技术有限公司
申请日： 2016-11-16 - 公布日： 2018-05-25 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明所述的是一种基于自环放大原理的循环DNA预扩增方法，此方法主要包括循环DNA自身环化以及改进的环式等温扩增两个步骤。这种预扩增方法大大提高了待检靶标分子数目，从而显著提高检测的灵敏度。此方法可应用于循环DNA，例如血浆游离DNA、血清游离DNA、尿液游离DNA、汗液DNA、唾液DNA以及FFPE切片中所提取的极微量DNA进行下游点突变检测、插入缺失(indel)、融合基因重排(SV)
循环DNA 预扩增游离DNA 自环放大血浆游离DNA 点突变检测汗液靶标分子等温扩增多项检测分子分型患者肿瘤临床用药融合基因医疗管理唾液DNA 等基因极微量灵敏度血清重排环化环式尿液切片肿瘤全程检测应用改进研究

[发明专利]一种血浆中循环DNA的提取试剂盒及方法-CN201810229021.9有效
发明人：于祥春;冯晓燕;林挺;王文利;龚建 -专利权人：北京爱普拜生物技术有限公司
申请日： 2018-03-13 - 公布日： 2019-02-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种从血浆中提取循环DNA的试剂盒及方法。本发明所述试剂盒包括DNA一步反应结合缓冲液、清洗液、洗脱液、与DNA结合柱配合使用的独立无菌包装循环DNA纯化延长管，可以保证不同起始体积的血浆样品一次性通过DNA结合柱，在快速高效地提取到高质量循环DNA的同时有效避免样品间的交叉污染，与常用试剂盒及方法相比，具有非常明显的优势。
循环DNA 试剂盒血浆结合缓冲液提取试剂盒一次性通过交叉污染无菌包装血浆样品一步反应清洗液洗脱液延长管保证

[发明专利]一种SPE法提取循环肿瘤DNA的方法-CN201711364691.3有效
发明人：梁鑫淼;李秀玲 -专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日： 2017-12-18 - 公布日： 2023-01-20 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供一种SPE法提取循环肿瘤DNA的方法，属生物技术领域。本发明具体步骤如下：1)将循环肿瘤DNA富集材料装入移液枪枪头或者凝胶上样吸头中，形成微固相萃取柱，采用洗脱液和上样液活化及平衡微固相萃取柱，将生物样品溶解于上样液中，并上到微固相萃取柱上，循环肿瘤DNA富集材料与生物样品的质量比为100～1000:1；2)采用5‑200倍柱体积的淋洗液冲洗萃取柱，淋洗液pH 0‑7；3)采用5‑100倍柱体积的洗脱液洗脱得循环肿瘤DNA，洗脱液pH 10‑12；所述DNA所述DNA富集材料为金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒。本发明的方法在提取循环肿瘤DNA方面表现出了高选择性和高通量等特点，可以实现循环肿瘤DNA的有效分离和富集。
一种 spe 提取循环肿瘤 dna 方法

[发明专利]一种富集提取循环肿瘤DNA的方法-CN201711366365.6在审
发明人：梁鑫淼;李秀玲;张小菲 -专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日： 2017-12-18 - 公布日： 2019-06-25 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本发明提供了一种富集提取循环肿瘤DNA的方法，属生物技术领域。本发明具体步骤如下：1)将循环肿瘤DNA富集材料装入移液枪枪头或者凝胶上样吸头中，形成微固相萃取柱，采用洗脱液和上样液活化及平衡微固相萃取柱，将生物样品溶解于上样液中，并上样到微固相萃取柱上，循环肿瘤DNA富集材料与生物样品的质量比为100‑1000:1；2)采用5‑200倍柱体积的淋洗液冲洗萃取柱，3)采用5‑100倍柱体积的洗脱液洗脱得DNA；上述整个过程在10‑60℃进行。所述循环肿瘤DNA富集材料为双组分聚合物功能化材料。本发明方法在提取循环肿瘤DNA方面表现出了高选择性和高通量等特点，可以实现对循环肿瘤DNA的有效分离和富集。
循环肿瘤固相萃取柱富集生物样品上样液洗脱液上样生物技术领域双组分聚合物功能化材料移液枪枪头高选择性有效分离高通量淋洗液质量比萃取柱活化凝胶吸头洗脱冲洗装入溶解平衡表现

[发明专利]一种定量检测循环肿瘤DNA的一体化芯片-CN202210406334.3在审
发明人：项楠;杨航;倪中华 -专利权人：东南大学
申请日： 2022-04-18 - 公布日： 2022-08-09 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种定量检测循环肿瘤DNA的一体化芯片，涉及微流控技术领域，解决了循环肿瘤DNA检测设备昂贵且操作复杂的技术问题，其技术方案要点是通过盖板层、滤膜层、PDMS流道层、PDMS薄膜层和玻璃层的按顺序堆叠实现多个功能模块，包括过滤模块、DNA提纯模块、混合模块、SDA模块及控制模块。全血经过过滤模块滤出血浆，然后进入DNA提纯模块进行磁珠法游离DNA提取，提纯后的DNA和核酸扩增试剂在混合流道充分混合后，进入SDA模块完成液滴制备与数字核酸扩增反应，最后根据正负液滴的个数定量出循环肿瘤DNA。具有小型化、免电化、操作简单的优点，能在一块芯片实现循环肿瘤DNA的前处理、提纯和定量检测。
一种定量检测循环肿瘤 dna 一体化芯片

[发明专利]PNA在检测DNA裂解片段中的应用-CN202010882833.0在审
发明人：叶盛;李思慧;朱晓玲;徐涛;梁兴国;方志俊;申志发;小宫山真 -专利权人：浙江原创医疗科技有限公司
申请日： 2020-08-28 - 公布日： 2021-03-19 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开了一种PNA在检测DNA裂解片段中的应用，以及相应的检测DNA裂解片段的方法和引物组。本发明通过基于修饰的PNA钳制PCR，来选择性扩增裂解后的DNA，而未被裂解的模板DNA则被PNA抑制，根据PCR结果即可定性或定量的分析酶促反应，可应用于监测酶活性、检测循环肿瘤DNA和循环胎儿DNA
pna 检测 dna 裂解片段中的应用

[发明专利]基于铂纳米粒子催化电化学循环信号放大技术测定DNA的电化学传感器和测定DNA的方法-CN201410273296.4有效
发明人：混旭;柏莉;谢国亮 -专利权人：青岛科技大学
申请日： 2014-06-18 - 公布日： 2014-08-27 - 主分类号： G01N27/26 文献下载
摘要：本发明涉及基于铂纳米粒子催化电化学循环信号放大技术测定DNA的电化学传感器的制备方法及其应用，将发卡DNA1自组装在铂纳米粒子修饰金电极表面，当有目标物DNA2存在时，由于目标物DNA2与组装在金电极表面表面上的发卡DNA1部分互补配对，打开DNA1的发卡结构；然后另外一条发卡DNA3链通过竞争配对杂交取代目标链DNA2，目标链DNA2被释放下来，释放的目标链则继续打开新的发卡结构，如此的循环作用实现了目标链DNA2的循环使用，结合制备的纳米粒子电化学探针实现信号的放大，再利用制备好的电化学传感器催化PAP与PQI之间的循环，实现了电化学信号的进一步放大，利用环伏安法或DPV测定电流信号强度，根据测得电流信号强度，实现对目标链DNA2测定。
基于纳米粒子催化电化学循环信号放大技术测定 dna 电化学传感器方法

[发明专利]体液循环DNA定量检测方法及试剂盒-CN201610924719.3有效
发明人：潘世扬;陈丹;徐建;黄珮珺;王芳 -专利权人：江苏科德生物医药科技有限公司
申请日： 2016-10-24 - 公布日： 2019-01-29 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明公开了体液循环DNA定量检测方法及试剂盒。选择人单拷贝看家基因β‑actin为检测靶基因，人工合成一长度为45bp的双链DNA片段，其中包含25bp与β‑actin基因相同的序列，并重组至质粒载体T‑Vector pMD20中获得重组质粒DNA作为内标以一定量投入待测体液样本中，与体液循环DNA同步进行保存、核酸提取纯化和荧光定量PCR扩增，以用于体液循环DNA定量分析。本发明通过特殊内标的设立，消除了体液样本分析前和分析中由于核酸降解、提取丢失和PCR扩增效率不同而造成的检测偏差，能够对体液循环DNA进行更加稳定准确的定量检测。
体液循环 dna 定量检测方法试剂盒

[发明专利]一种引物、试剂盒及用途-CN201810432612.6有效
发明人：林云富 -专利权人：浙江品级基因科技有限公司
申请日： 2018-05-08 - 公布日： 2022-11-29 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：所述引物包括：5’末端的通用扩增引物序列、3’末端的与靶向DNA基因组序列互配的特异性引物序列，以及位于5’端和3’端中间的随机分子条码序列。利用本发明的引物可以有效地对循环肿瘤DNA分子加上分子条码，从而大大地提高循环肿瘤DNA的检测灵敏度。同时，本发明是针对原始循环肿瘤DNA分子进行加分子条码，也使得测定其绝对数量成为可能。本发明对于提高循环肿瘤DNA的检测灵敏度，有着非常重要的意义和实用价值。
一种引物试剂盒用途

[发明专利]一种基于循环肿瘤DNA的恶性肿瘤早期筛查系统-CN202010859550.4在审
发明人：张伟;孟涛;马少杰;李文娟 -专利权人：西安时代基因健康科技股份有限公司
申请日： 2020-08-24 - 公布日： 2020-11-20 - 主分类号： G16B20/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于循环肿瘤DNA的恶性肿瘤早期筛查系统，该恶性肿瘤早期筛查系统同时利用了样本循环游离DNA和白细胞基因组DNA中存在的突变，结合恶性肿瘤突变捕获文库及恶性肿瘤相关的病理性突变位点比对，对非肿瘤特异性的基因突变进行剔除，可以从样本的基因突变中提取恶性肿瘤细胞释放入血液循环系统的特异性的分子标志物，即循环肿瘤DNA突变位点。本发明基于人体循环肿瘤DNA的变异情况，可以对恶性肿瘤进行早期筛查，并提高筛查的敏感性和特异性。
一种基于循环肿瘤 dna 恶性肿瘤早期系统

[发明专利]一种评价土壤活性的检测方法-CN202111299403.7有效
发明人：王旭伟 -专利权人：宁波市农业技术推广总站
申请日： 2021-11-04 - 公布日： 2022-07-19 - 主分类号： G16B20/30 文献下载
摘要：本发明公开了一种评价土壤活性的检测方法，用土壤宏基因技术对土壤中微生物的总体DNA进行分析并构建DNA文库，并采用微阵列技术批量对DNA文库里的DNA序列进行识别，快速确定提取的土壤微生物DNA中参与碳循环和氮循环的编码基因丰富度，从而得到被测土壤中的微生物参与的碳循环和氮循环种类框架构图，然后通过测定土壤中二氧化碳的变化量确定土壤中微生物的呼吸碳变化总量，通过采用15N放射性标记的诱导底物诱导待土壤微生物的DNA进行表达确定土壤中微生物的生物氮变化量，从而确定土壤参与碳循环和氮循环的总量并得到土壤活性信息。
一种评价土壤活性检测方法

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